Nat Genet：利用CRISPR鑒定出潛在的HIV治療靶標(biāo)

2018-04-05 來源：生物制藥觀察標(biāo)簽：掌上醫(yī)生喝茶減肥一天瘦一斤安全減肥 cps聯(lián)盟美容護(hù)膚

摘要：利用CRISPR對(duì)源自HIV敏感性的CD4陽性T細(xì)胞的一種細(xì)胞系進(jìn)行篩選，研究人員鑒定出5個(gè)基因：當(dāng)讓它們失活時(shí)，會(huì)讓細(xì)胞免受HIV感染，同時(shí)不會(huì)影響細(xì)胞存活。

在一項(xiàng)新的研究中，來自美國(guó)懷特海德研究所、拉根研究所和布羅德研究所的研究人員利用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)鑒定出三個(gè)有望用于治療HIV感染的新靶標(biāo)。他們描述了如何利用CRISPR篩選HIV感染但不是細(xì)胞存活所必需的人基因的方法鑒定出5個(gè)基因---它們的三個(gè)在早前的利用RNA干擾（RNAi）的研究中并未被鑒定出。他們的方法也能夠被用來鑒定出針對(duì)其他的病毒性病原體的治療性靶標(biāo)。相關(guān)研究結(jié)果于2016年12月19日在線發(fā)表在NatureGenetics期刊上，論文標(biāo)題為“Agenome-wideCRISPRscreenidentifiesarestrictedsetofHIVhostdependencyfactors”。論文通信作者為DavidMSabatini、EricSLander、NirHacohen和BruceDWalker。

Sabatini觀察到，“考慮之前發(fā)表的一些文獻(xiàn)，我們吃驚地發(fā)現(xiàn)存在如此少的宿主因子是HIV感染所需的。”而且，Sabatini注意到“這種基于CRISPR的篩選方法的美妙之處在于它們產(chǎn)生明確的和可靠的結(jié)果”。

論文共同第一作者RyanJ.Park博士說，“當(dāng)前的抗HIV藥物靶向病毒蛋白。因?yàn)镠IV非?？焖俚匕l(fā)生突變，所以耐藥性HIV毒株經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)，特別是當(dāng)病人忘記服用他們的藥物時(shí)。開發(fā)新的藥物來靶向HIV感染所需的人基因同時(shí)使得耐藥性產(chǎn)生的機(jī)會(huì)潛在地更少是一種大有希望的HIV治療方法。”

Walker解釋道，“病毒是非常小的，具有非常少的基因---HIV僅有9個(gè)基因，而人有19,000多個(gè)基因---因此，病毒征用人基因來制造它們進(jìn)行復(fù)制所必需的構(gòu)成單元（buildingblock）。我們的目標(biāo)是鑒定出HIV進(jìn)行復(fù)制所必需的但是能夠被剔除而不會(huì)對(duì)病人造成傷害的人基因（也被稱作宿主基因）”。

論文共同第一作者TimWang解釋道，“CRISPR使得在DNA水平上對(duì)基因進(jìn)行完全敲除是可能實(shí)現(xiàn)的；我們的全基因組的基于CRISPR-Cas9的方法靶向18,500多個(gè)基因，它們中的絕大多數(shù)是人蛋白編碼基因。我們的研究展現(xiàn)了基于CRISPR的篩選方法如何被用來鑒定出在其他的病毒性病原體存活中起著至關(guān)重要作用但是對(duì)宿主細(xì)胞活力是非必要的宿主因子。這種方法的廣泛應(yīng)用應(yīng)當(dāng)會(huì)查明一類新的潛在治療性靶標(biāo)，它們之前并未被探究用于傳染病治療中。”

Hacohen補(bǔ)充道，“我們的研究的一個(gè)重要方面是重點(diǎn)關(guān)注人T細(xì)胞（一種免疫細(xì)胞），即HIV感染的主要靶標(biāo)，和鑒定出在病毒對(duì)T細(xì)胞的感染中起著最為顯著性作用的宿主基因。”

之前的研究已鑒定出幾種宿主依賴性因子，包括HIV侵入CD4陽性T細(xì)胞所需的兩種蛋白：CD4分子本身，HIV就結(jié)合到這種分子上；CCR5，它促進(jìn)常見的HIV毒株結(jié)合。攜帶特定CCR5突變的個(gè)人對(duì)這些病毒毒株產(chǎn)生免疫力---確實(shí)，唯一被認(rèn)為治愈HIV感染的一個(gè)人就是接受來自攜帶這種CCR5突變的供者的骨髓移植。盡管治療性CCR5抑制劑已被開發(fā)出，并且在臨床上進(jìn)行使用，但是它們能夠造成嚴(yán)重的副作用。

2008年的三項(xiàng)利用RNAi鑒定潛在的宿主依賴性因子的研究鑒定出800多種可能的靶標(biāo)；但是這些研究結(jié)果之間很少存在重疊提示著存在較高的假陽性。此外，在這三項(xiàng)研究中，沒有一項(xiàng)是利用HIV靶向的免疫細(xì)胞開展的，這也會(huì)降低鑒定出實(shí)際上參與HIV感染CD4陽性T細(xì)胞的基因的概率。

Wang解釋道，“RNAi抑制但不會(huì)完全阻斷基因表達(dá)---這可能允許靶基因產(chǎn)生足夠多的蛋白來允許HIV感染---而且它也能夠抑制靶基因之外的其他基因表達(dá)，從而導(dǎo)致假陽性結(jié)果。”

利用CRISPR對(duì)源自HIV敏感性的CD4陽性T細(xì)胞的一種細(xì)胞系進(jìn)行篩選，研究人員鑒定出5個(gè)基因：當(dāng)讓它們失活時(shí)，會(huì)讓細(xì)胞免受HIV感染，同時(shí)不會(huì)影響細(xì)胞存活。除了CD4和CCR5之外，這種篩選方法鑒定出編碼兩種酶的基因---TPST2和SLC35B2：它們對(duì)CCR5進(jìn)行修飾以便HIV結(jié)合。另一個(gè)被鑒定出的基因是ALCAM，它參與細(xì)胞間粘附。當(dāng)CD4陽性T細(xì)胞接觸低水平HIV病毒時(shí)，正如在自然傳播中可能觀察到的那樣，ALCAM缺失與顯著地抵抗HIV感染相關(guān)聯(lián)。

Park解釋道，“在我們的細(xì)胞系中，ALCAM是細(xì)胞間粘附所必需的，從而允許病毒更加高效地從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到下一個(gè)細(xì)胞。事實(shí)上，我們發(fā)現(xiàn)人工誘導(dǎo)缺乏ALCAM的細(xì)胞聚集會(huì)恢復(fù)HIV的細(xì)胞間傳播。還需開展進(jìn)一步的研究來探究靶向這些基因是否對(duì)人體是有毒性的。然而，即便系統(tǒng)性抑制會(huì)有毒性作用，僅在CD4陽性T細(xì)胞或它們的前體細(xì)胞中選擇性地靶向這些基因可能會(huì)避免這些毒性，不過應(yīng)注意到基因療法仍然是一種充滿挑戰(zhàn)性的潛在高成本的治療方法。”

看本篇文章的人在健客購買了以下產(chǎn)品更多>

本品用于免疫損傷引起巨細(xì)胞病毒感染的患者。 1、用于免疫功能損傷(包括艾滋病患者)發(fā)生的巨細(xì)胞病毒性視網(wǎng)膜炎的維持治療。 2、預(yù)防可能發(fā)生干器官移植受者的巨細(xì)胞病毒感染。 3、預(yù)防晚期HIV感染患者的巨細(xì)胞病毒感染。

健客價(jià)：￥79

適用于其它抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物合用，治療HIV-1感染。

健客價(jià)：￥496

該產(chǎn)品適用于測(cè)量18周歲及以上的成人組織間液中的葡萄糖水平,用于糖尿病的自我管理,不能作為治療藥物調(diào)整的依據(jù)。掃描檢測(cè)儀中內(nèi)置的血糖血酮檢測(cè)模塊可用于測(cè)量采自指尖、前臂、上臂或拇指根部新鮮毛細(xì)血管全血中的葡萄糖濃度，和采自指尖和靜脈的新鮮全血中的β-羥丁酸濃度，不能用于糖尿病的診斷和篩查，也不能作為治療藥物調(diào)整的依據(jù)。與其配套的輔理善瞬感軟件可以幫助患者或醫(yī)護(hù)人員查看、分析和評(píng)估由掃描式葡萄糖監(jiān)測(cè)

健客價(jià)：￥450

清熱解毒、活血益氣。用于艾滋病毒感染者以及艾滋病患者(CD4淋巴細(xì)胞在100-400個(gè)/mm 3之間)，有提高CD4淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)作用，可改善乏力、脫發(fā)、食欲減退和腹瀉等癥狀，改善活動(dòng)功能狀況。

健客價(jià)：￥82

恩曲他濱替諾福韋適用于與其他抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物聯(lián)用，治療成人和12歲（含）以上兒童的 HIV-1感染。

健客價(jià)：￥1980

恩曲他濱替諾福韋片：恩曲他濱替諾福韋適用于與其他抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物聯(lián)用，治療成人和12歲（含）以上兒童的 HIV-1感染。唐草片：清熱解毒、活血益氣。用于艾滋病毒感染者以及艾滋病患者(CD4淋巴細(xì)胞在100-400個(gè)/mm 3之間)，有提高CD4淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)作用，可改善乏力、脫發(fā)、食欲減退和腹瀉等癥狀，改善活動(dòng)功能狀況。

健客價(jià)：￥14999

人類免疫缺陷病毒抗體(HIV1/2)口腔黏膜滲出液檢測(cè)試劑(免疫層析法)(Wondfo)

用于檢測(cè)口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體

健客價(jià)：￥48

該產(chǎn)品用于定性檢測(cè)全血、血清、血漿中的HIV1/2抗體。

健客價(jià)：￥39

用于檢測(cè)口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體

健客價(jià)：￥45

該產(chǎn)品應(yīng)用免疫層析雙抗原夾心法原理檢測(cè)人血清、血漿、全血中的HIV1/HIV2型抗體。

健客價(jià)：￥16.9

維爾人類免疫缺陷病毒抗體(HIV1/2)口腔分泌物檢測(cè)試劑盒(膠體金法)(維爾)

該產(chǎn)品用于定性檢測(cè)口腔分泌物中HIV1/2型抗體。

健客價(jià)：￥35

本試劑盒用于體外定性檢測(cè)人口腔粘膜滲出液中的HIV-1/2型人類免疫缺陷病毒抗體。

健客價(jià)：￥289.5

AIDS(艾滋)病人鳥分枝桿菌感染綜合征，肺炎，慢性抗藥性肺結(jié)核。

健客價(jià)：￥295

- 婦科：外陰陰道念珠菌病。- 皮膚科/眼科： - 花斑癬、皮膚真菌病、真菌性角膜炎和口腔念珠菌病。 - 由皮膚癬菌和/或酵母菌引起的甲真菌病。 - 系統(tǒng)性真菌感染：系統(tǒng)性曲霉病及念珠菌病、隱球菌?。ò[球菌性腦膜炎）*、組織胞漿菌病、孢子絲菌病、副球孢子菌病、芽生菌病和其它各種少見的系統(tǒng)性或熱帶真菌病。 *注：對(duì)于免疫受損的隱球菌病患者及所有中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌病患者，只有在一線

健客價(jià)：￥132

本品適用于各種癬病的治療，包括頭癬、須癬、體癬、股癬、足癬和甲癬。上述癬病由深紅色發(fā)癬菌、斷發(fā)癬菌、須發(fā)癬菌、指間發(fā)癬菌等以及奧杜安小孢子菌、犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌和絮狀表皮癬菌等所致。本品不宜用于輕癥、局限的淺部真菌感染及局部用抗真菌藥已可奏效者?；尹S霉素對(duì)念珠菌屬、組織胞漿菌屬、放線菌屬、孢子絲菌屬、芽生菌屬、球孢子菌屬、奴卡菌屬及隱球菌屬等感染及花斑癬均無效。

健客價(jià)：￥13

-治療HIV陽性或免疫系統(tǒng)損害患者的口腔和/或食道念珠菌病。 -對(duì)血液系統(tǒng)腫瘤、骨髓移植患者和預(yù)期發(fā)生中性粒細(xì)胞減少癥（亦即<500細(xì)胞/μ1）的患者，可預(yù)防深部真菌感染的發(fā)生。 -對(duì)于伴有發(fā)熱的中性粒細(xì)胞減少癥患者，疑為系統(tǒng)性真菌病時(shí)，可作為伊曲康唑注射液經(jīng)驗(yàn)治療的序慣療法。

健客價(jià)：￥688

適用于治療十二指腸潰瘍、胃潰瘍(伴有幽門螺旋菌Hp感染者)，特別是復(fù)發(fā)性及難治性潰瘍；慢性胃炎(伴有幽門螺旋菌Hp感染者)，用一般藥物治療無效而癥狀又較重者。

健客價(jià)：￥23.5

本品適用于有胃腸道功能或部分胃腸道功能而不能或不愿吃足夠數(shù)量的常規(guī)食物以滿足機(jī)體營(yíng)養(yǎng)需求的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)治療的病人，主要用于： 1．代謝性胃腸道功能障礙 -胰腺炎 -腸道炎性疾病 -放射性腸炎和化療 -腸瘺 -短腸綜合征 -艾滋病病毒/艾滋病 2．危重疾病 -大面積燒傷 -創(chuàng)傷 -膿毒血癥 -大手術(shù)后的恢復(fù)期 3．營(yíng)養(yǎng)不良病人的手術(shù)前喂養(yǎng) 4．腸道準(zhǔn)備本品能用于糖

健客價(jià)：￥84

1.本品作為選用藥物之一，可用于下列疾病。立克次體病，如流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、洛磯山熱、恙蟲病和Q熱。支原體屬感染。衣原體屬感染，包括鸚鵡熱、性病、淋巴肉牙腫、非特異性尿道炎、輸卵管炎、宮頸炎及沙眼?；貧w熱。布魯菌病?；魜y。兔熱病。鼠疫。軟下疳。治療布魯菌病和鼠疫時(shí)需與氨基糖苷類聯(lián)合應(yīng)用。2.由于目前常見致病菌對(duì)四環(huán)素類耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，僅在病原菌對(duì)本品敏感時(shí)，方有應(yīng)用指征。葡萄球菌屬大多對(duì)

健客價(jià)：￥7.2