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便攜、低成本的單細(xì)胞RNA測序新手段

2017-02-20 來源:生物探索  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:MIT的研究人員已經(jīng)開發(fā)出一種便攜式技術(shù),可以快速制備多種細(xì)胞的RNA同時進行測序,他們相信這種方法將會更廣泛地被應(yīng)用。

  每個細(xì)胞的基因表達(dá)譜隨其功能而異。從血液或組織樣本中的許多單個細(xì)胞中提取RNA可以根據(jù)基因表達(dá)模式區(qū)分細(xì)胞。這使科學(xué)家有機會確定細(xì)胞功能,包括它們在疾病中的作用或?qū)χ委煹姆磻?yīng)。

  MIT的研究人員已經(jīng)開發(fā)出一種便攜式技術(shù),可以快速制備多種細(xì)胞的RNA同時進行測序,他們相信這種方法將會更廣泛地被應(yīng)用。新的技術(shù)被稱為Seq-Well,可以讓科學(xué)家在組織樣本中更容易識別不同類型的細(xì)胞,幫助他們研究免疫細(xì)胞如何對抗感染和癌細(xì)胞對治療的反應(yīng)以及其它的應(yīng)用。

  單細(xì)胞測序的難點

  對大量細(xì)胞進行單細(xì)胞測序的關(guān)鍵是保持跟蹤哪些RNA轉(zhuǎn)錄本來自哪個細(xì)胞。這需要將細(xì)胞分開在單個管或多孔板格中,然后分別轉(zhuǎn)化成測序文庫。

  這個過程用利用毛細(xì)管直接吸取細(xì)胞內(nèi)容物的顯微操作可以進行,但不能處理含有數(shù)千個細(xì)胞大樣本,如血液樣本或組織活檢,且成本在25元至35美元/每細(xì)胞。Shalek等人最近開發(fā)的微流控技術(shù)來讓分選過程自動化和平行化,盡管微流控技術(shù)最近在生命科學(xué)領(lǐng)域有革命性作用,但所需的設(shè)備量使得它不可能被輕易搬運。

  作者對發(fā)明的介紹

  通訊作者AlexK.Shalek說:“不是選擇用一個標(biāo)記定義的細(xì)胞類型,而用單細(xì)胞的RNA測序,我們可以看看某個細(xì)胞在特定時刻的表達(dá)。”

  Shalek和他的同事們在過去幾年的發(fā)展單細(xì)胞RNA測序策略。在這項新的研究中,他與MIT的化學(xué)工程學(xué)副教授J.ChristopherLove合作創(chuàng)建了一種新的技術(shù),可以使用非常簡單的設(shè)備快速分析大量的細(xì)胞。

  Love博士說:“我們將Shalek的技術(shù)和我們的結(jié)合起來,是研究人員能夠在不同的臨床樣本和設(shè)備的范疇中進行這種測序。這種方法克服了現(xiàn)在的一些障礙,能讓大家更廣泛地采用這些技術(shù)。這是一個簡單的系統(tǒng)并帶到能到世界各地去,我認(rèn)為它有著難以置信的力量。”

  該技術(shù)具有快速分析能力

  在過去的幾年里,Love的實驗室開發(fā)出一種微型系統(tǒng),能分離出單個的細(xì)胞和檢測每個細(xì)胞分泌的抗體和其它蛋白。這個設(shè)備類似于一個小型的冰托盤,每個細(xì)胞有獨立的隔間。Love開發(fā)了一個叫做microengraving的過程使用這些托盤。這些托盤可以容納數(shù)以萬計的細(xì)胞,來檢測每個細(xì)胞蛋白質(zhì)的分泌。

  Shalek和Love這兩個在一起合作的研究者,意識到Love開發(fā)的從單細(xì)胞分析其蛋白分泌的技術(shù)能夠用于設(shè)計一個便攜式設(shè)備快速、廉價地來進行單細(xì)胞RNA測序。

  使用此方法對RNA進行測序,研究人員建立了捕捉單個細(xì)胞的納米隔間陣列,用有條碼的磁珠捕獲RNA片段。每個納米隔間用半透膜封閉允許化學(xué)信號通過。當(dāng)RNA結(jié)合到磁珠上后,將其移除并測序。使用這個過程,每個單元格的成本小于1美元。

  用此技術(shù)揭開未知

  類似以前的單細(xì)胞RNA測序技術(shù),Seq-well過程能夠很好捕獲和分析序列約每個細(xì)胞10至15%的RNA轉(zhuǎn)錄。

  在這篇文章中,研究者使用Seq-Well對被稱為巨噬細(xì)胞的免疫細(xì)胞進行分析,這些巨噬細(xì)胞來源于感染了肺結(jié)核的樣本。這個新方法讓他們能夠識別不同的現(xiàn)有巨噬細(xì)胞群體的對感染的反應(yīng)。Shalek和他的實驗室成員也將這個技術(shù)帶到了南非,在那里分析結(jié)核病人和HIV感染患者的樣本。

  Love的實驗室現(xiàn)在使用這種方法來分析人的免疫細(xì)胞與食物過敏,這可能有助于研究人員確定為什么有些人更可能對治療他們過敏的療法反應(yīng)良好。Love認(rèn)為在慢性病中仍有許多未知因素,這些類型的工具幫助研究人員發(fā)現(xiàn)新的見解。

  研究小組還聯(lián)手與DanaFarber/哈佛癌癥中心的臨床研究者,將此技術(shù)應(yīng)用于新的組合療法治療癌癥。

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