茶多酚如何對皮膚發(fā)揮抗氧化保護作用?
摘要:刺激因素在一定程度上會造成各種皮膚細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷,從而導(dǎo)致如日曬傷、光老化、黑素瘤、自身免疫性皮膚病、皮膚異常纖維化等多種皮膚疾病的發(fā)生
皮膚作為人體最大器官,是抵御外界各種理化刺激的第一道防線。刺激因素在一定程度上會造成各種皮膚細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷,從而導(dǎo)致如日曬傷、光老化、黑素瘤、自身免疫性皮膚病、皮膚異常纖維化等多種皮膚疾病的發(fā)生。茶多酚具有強大的抗氧化作用,文獻(xiàn)報道其主要通過直接清除活性氧自由基,抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng),誘導(dǎo)氧化的過渡金屬離子絡(luò)合,激活細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)這幾條途徑發(fā)揮抗氧化作用。核轉(zhuǎn)錄因子Bach1與Nrf2均屬于亮氨酸拉鏈家族中一員,參與調(diào)控抗氧化應(yīng)激反應(yīng)。梁碧華等采用適宜濃度茶多酚孵育人皮膚成纖維細(xì)胞(HSF),觀察其對Nrf2/Bach1mRNA及Nrf2/Bach1核蛋白表達(dá)及分布的影響,探討茶多酚抗氧化機制。
茶多酚對人皮膚成纖維細(xì)胞Nrf2/Bach1mRNA及核蛋白的影響
不同濃度茶多酚(0、2.5、5、10、20、40mg/L)孵育HSF24h,MTT法檢測細(xì)胞增殖活性,篩選出適宜濃度茶多酚,并用該濃度
藥物孵育HSF24h,RT?qPCR法檢測Nrf2和Bach1mRNA表達(dá),Western印跡法檢測Nrf2、Bach1核蛋白表達(dá),免疫熒光法檢測Nrf2、Bach1蛋白核分布情況。
結(jié)果顯示,當(dāng)茶多酚濃度為5mg/L時,對HSF增殖無明顯影響,故后續(xù)實驗采用5mg/L茶多酚,對照組濃度為0。HSF加入茶多酚孵育后,Bach1mRNA相對表達(dá)量(0.629&plu
smn;0.077)及其核蛋白表達(dá)(1.424±0.171)均顯著低于對照組(0.940±0.033;16.966±1.702),而Nrf2mRNA(1.467±0.076)及其核蛋白表達(dá)(6.929±0.121)均顯著高于對照組(0.977±0.091;3.537±0.126),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。免疫熒光結(jié)果顯示,Nrf2蛋白在細(xì)胞核內(nèi)的聚集增多,Bach1蛋白在細(xì)胞核內(nèi)聚集減少。提示茶多酚可促進Nrf2mRNA、Nrf2核蛋白的表達(dá)及核分布,抑制Bach1mRNA、Bach1核蛋白的表達(dá)和核分布,從而發(fā)揮抗氧化作用。