脂多糖對成牙本質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞連接影響的體外研究
摘要:研究指出,LPS能夠下調(diào)成牙本質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、E-cadherinmRNA的表達(dá)水平,以及E-cadherin的蛋白表達(dá)水平,對NF-κB的抑制能在一定水平上影響上述過程,表明NF-κB參與了LPS對成牙本質(zhì)細(xì)胞連接的破壞。
近日,第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院牙體牙髓病科軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究人員發(fā)表論文,旨在研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)對成牙本質(zhì)細(xì)胞(odontoblast-lineagecells,OLCs)細(xì)胞連接的影響。研究指出,LPS能夠下調(diào)成牙本質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、E-cadherinmRNA的表達(dá)水平,以及E-cadherin的蛋白表達(dá)水平,對NF-κB的抑制能在一定水平上影響上述過程,表明NF-κB參與了LPS對成牙本質(zhì)細(xì)胞連接的破壞。該文發(fā)表在2014年第04期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
在細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入不同濃度LPS(10、100、1000ng/mL)作用于OLCs,并以條件培養(yǎng)基(10ng/mLLPS)中同時(shí)加入NF-κB抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(Pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)和LPS組為對照;分別培養(yǎng)0.5、1、2、6h各時(shí)間點(diǎn)采用Westernblot觀察細(xì)胞連接蛋白E-cadherin水平的變化;以實(shí)時(shí)定量PCR觀察細(xì)胞連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherinmRNA水平的改變。
經(jīng)過LPS處理后,ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherin的mRNA表達(dá)水平明顯降低,且在一定的作用時(shí)間范圍內(nèi)呈時(shí)間依賴性(P<0.05),但LPS在濃度10~1000ng/mL之間作用無明顯差異(P>0.05)。同時(shí),E-cadherin在蛋白水平隨著LPS作用時(shí)間的延長其表達(dá)水平逐漸降低,而當(dāng)加入NF-κB抑制劑PDTC時(shí)則能抑制這種效應(yīng)。