3D培養(yǎng)牙周膜干細(xì)胞生物學(xué)特性的初步研究
摘要：研究指出，3D懸滴培養(yǎng)法是一種理想的PDLSCs培養(yǎng)方法。該文發(fā)表在2014年第05期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
近日，南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院研究人員發(fā)表論文，旨在研究懸滴法3D培養(yǎng)和2D貼壁培養(yǎng)的牙周膜干細(xì)胞（PDLSCs）生物學(xué)特性的差異。研究指出，3D懸滴培養(yǎng)法是一種理想的PDLSCs培養(yǎng)方法。該文發(fā)表在2014年第05期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
改良酶消化組織塊法分離培養(yǎng)PDLSCs，分別行2D貼壁培養(yǎng)及3D培養(yǎng)（3D培養(yǎng)按不同細(xì)胞接種數(shù)分為2.5×104，5×104及1×1053組），培養(yǎng)96h后分別用Live/Dead染色法分析細(xì)胞活性；流式細(xì)胞術(shù)檢測干細(xì)胞表面標(biāo)記物；然后對2D、3D培養(yǎng)的PDLSCs進(jìn)行礦化誘導(dǎo)，茜素紅染色及熒光定量PCR檢測礦化結(jié)節(jié)形成情況以及礦化相關(guān)基因ALP和OPNmRNA的表達(dá)水平。
3D培養(yǎng)的PDLSCs可形成致密的細(xì)胞聚合物，2.5×104組PDLSCs細(xì)胞聚合物中心未見壞死現(xiàn)象，5×104組和1×105組則有較為明顯壞死現(xiàn)象；3D和2D培養(yǎng)的PDLSCs間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物的陽性表達(dá)率均無顯著差異（P>0.05）；茜素紅染色和熒光實時定量PCR結(jié)果顯示，3D培養(yǎng)的PDLSCs形成礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量及其礦化相關(guān)基因ALPOPNmRNA的表達(dá)水平均顯著高于2D培養(yǎng)的細(xì)胞（P<0.05）。
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