梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種慢性、系統(tǒng)性的性傳播疾病，傳播途徑多、傳染性強(qiáng)，對(duì)社會(huì)和人類健康造成巨大危害。據(jù)國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委疾病預(yù)防控制局發(fā)布的《2016年全國(guó)法定傳染病疫情概況》，2016年我國(guó)梅毒報(bào)告發(fā)病數(shù)居傳染病類第三位，逾43萬(wàn)例，發(fā)病率高達(dá)31.967/10萬(wàn)。

日前，在西安舉辦的“2017中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)師年會(huì)暨第十二屆全國(guó)檢驗(yàn)與臨床學(xué)術(shù)會(huì)議”上，四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科陶傳敏教授分享了國(guó)際權(quán)威梅毒管理指南及國(guó)內(nèi)外大型研究對(duì)于梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程的臨床應(yīng)用評(píng)估及推薦，就梅毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略及不同流程的應(yīng)用進(jìn)行了深入分析與探討。

由于梅毒臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，癥狀可能與其它疾病相似，臨床診療難度很大，準(zhǔn)確、可靠、高效的檢測(cè)策略和方法是實(shí)現(xiàn)梅毒早期診斷和鑒別診斷的關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)室亟需進(jìn)一步提高梅毒檢測(cè)水平，以期更好地指導(dǎo)臨床、有效控制梅毒傳播。

梅毒感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)首選特異性檢測(cè)方法

梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法主要分成三大類：病原體檢測(cè)、核酸檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)。病原體檢測(cè)主要是用暗視野顯微鏡和鍍銀染色，方法繁瑣不適合實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)；而核酸方法和病原體檢測(cè)都受病原體在局部的影響，容易發(fā)生漏檢。因此，血清學(xué)檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的主要手段。

血清學(xué)檢測(cè)包括非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)（NTT）和梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)（TT）。前者屬于非特異性抗體檢測(cè)，主要包括性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（VDRL）、快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST），這可能會(huì)在自身免疫性疾病患者或孕婦中呈假陽(yáng)性以及在晚期患者中呈假陰性。后者屬于特異性檢測(cè)，主要包括梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)/梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPHA/TPPA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA/EIA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA/CIA）等，這類方法檢測(cè)的是梅毒螺旋體特異性抗體，特異性及敏感度均較高。

梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流程主要包括傳統(tǒng)檢測(cè)流程和反向檢測(cè)流程，兩者的區(qū)別在于采用哪一種方法作為初篩的檢測(cè)手段。傳統(tǒng)檢測(cè)流程是先進(jìn)行NTT，結(jié)果陽(yáng)性的患者再進(jìn)行TT，結(jié)果陽(yáng)性確認(rèn)新感染或曾經(jīng)治療過(guò)；反向檢測(cè)流程反之，對(duì)于TT結(jié)果陽(yáng)性的患者進(jìn)行NTT，若結(jié)果陰性再進(jìn)行第二種TT檢測(cè)，結(jié)果陽(yáng)性則表示近期再次感染或曾經(jīng)治療過(guò)。現(xiàn)在還有一種是歐洲疾病預(yù)防控制中心（ECDC）流程，這是一個(gè)更簡(jiǎn)化的反向流程，先進(jìn)行TT，結(jié)果陽(yáng)性的患者直接再進(jìn)行第二種TT檢測(cè)。

目前，對(duì)于梅毒的實(shí)驗(yàn)室篩查與診斷流程，越來(lái)越多地傾向于用反向檢測(cè)流程。美國(guó)疾病控制中心發(fā)布的《2015性傳播疾病治療指南》提出反向流程對(duì)患者診斷更為全面，能夠檢測(cè)出既往治療過(guò)、未治療或不完全治療的梅毒患者，以及低感染率人群的假陽(yáng)性情況?！?014歐洲梅毒管理指南》推薦TT作為單獨(dú)的初篩方法，并應(yīng)采用全自動(dòng)EIA/CIA，NTT只能檢測(cè)到現(xiàn)癥梅毒，相比TT會(huì)漏檢很早期的梅毒感染?！?015英國(guó)梅毒管理指南》也推薦EIA/CLIA作為初篩方法，同時(shí)檢測(cè)免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白G（IgG），并特別提到初篩陽(yáng)性后再用另一種TT方法進(jìn)行確認(rèn)。

陶傳敏教授指出：“我國(guó)現(xiàn)在絕大部分實(shí)驗(yàn)室和血站主要是用反向檢測(cè)流程，用特異性抗體首先開(kāi)始進(jìn)行篩查，對(duì)于篩查陽(yáng)性的患者建議做非特異性檢測(cè)，同時(shí)結(jié)合臨床表現(xiàn)和流行病學(xué)史進(jìn)行診斷。對(duì)性病門診患者沒(méi)有必要區(qū)分反向流程和傳統(tǒng)流程，應(yīng)該建議患者同時(shí)做這兩類不同的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，這樣可以節(jié)約時(shí)間。”

電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法有效提高梅毒檢測(cè)質(zhì)量

梅毒螺旋體抗原極不穩(wěn)定，試劑性能的優(yōu)異取決于更高的設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于免疫試劑的設(shè)計(jì)，抗原的篩選和制備工藝需要非?？季?。羅氏診斷對(duì)抗原組合進(jìn)行嚴(yán)格篩選和評(píng)估，最終選取了最有優(yōu)勢(shì)的抗原成分進(jìn)行重組；同時(shí)優(yōu)化了抗原序列，以實(shí)現(xiàn)試劑的穩(wěn)定性和特異性，并采用了易大規(guī)模生產(chǎn)的高可溶性抗原，配合羅氏專有的解決方案，即抗原伴侶的應(yīng)用，與天然抗原極度接近的表位的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)只與抗原伴侶結(jié)合，不和特異性抗體結(jié)合，從而降低假陽(yáng)性率。羅氏診斷Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗原特異性抗體電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒于2014年8月正式在中國(guó)獲批上市。該技術(shù)使用雙抗原夾心法（DAGS）檢測(cè)梅毒螺旋體總抗體，血清樣本僅需10μL，在18分鐘時(shí)間內(nèi)即可完成整個(gè)檢測(cè)過(guò)程，是目前可靠、高效的梅毒特異性檢測(cè)方法。

2015年，ClinicalandVaccineImmunology雜志發(fā)表了一項(xiàng)由全球6個(gè)國(guó)家8家研究中心參與的梅毒檢測(cè)國(guó)際多中心研究結(jié)果，四川大學(xué)華西醫(yī)院成為唯一一個(gè)中國(guó)中心，參加了歐洲同步的性能評(píng)估。結(jié)果顯示：與其它方法學(xué)梅毒檢測(cè)試劑相比，羅氏診斷Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗體檢測(cè)在靈敏度、特異性、臨床樣本敏感性等綜合性能表現(xiàn)最佳，并且可100%檢測(cè)出不同分期梅毒感染樣本。

2016年，微生物學(xué)領(lǐng)域經(jīng)典期刊JournalofClinicalMicrobiology雜志發(fā)表了一項(xiàng)對(duì)六種自動(dòng)化梅毒螺旋體抗體檢測(cè)方法的比較研究結(jié)果，對(duì)比其它方法學(xué)梅毒檢測(cè)試劑，Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗體檢測(cè)的敏感性、特異性和一致性表現(xiàn)優(yōu)異，其中，敏感性達(dá)到99.4%，特異性達(dá)到100%，一致性是99.8%，無(wú)一例假陽(yáng)性結(jié)果和漏檢情況發(fā)生。

陶教授指出：“臨床上有一些潛在因素，如合并其它傳染病、自身免疫性疾病、腫瘤、妊娠等，可能會(huì)干擾到梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，因此，選擇抗干擾能力強(qiáng)的檢測(cè)方法對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。”Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗體檢測(cè)采用抗干擾模式，可有效避免交叉反應(yīng)，針對(duì)干擾樣本的評(píng)估研究顯示，具有極佳的特異性與靈敏度，對(duì)人類免疫缺陷病毒感染、EB病毒（EBV）感染和萊姆?。↙yme）的特異性均達(dá)到100%。