帕金森?。≒D）是最常見的神經(jīng)退行性疾病之一，晚期病理改變?yōu)槠湓\斷金標(biāo)準(zhǔn)。目前，臨床上亟需能夠用于診斷PD的生物學(xué)標(biāo)志物，尤其是用于疾病早期診斷的指標(biāo)。

　　近日，JNeurolNeurosurgPsychiatry雜志發(fā)表的最新綜述針對(duì)這一問題，列舉并探討了目前最具前景的腦脊液候選標(biāo)志物。具體內(nèi)容如下：

　　原發(fā)性帕金森病（iPD）是一種進(jìn)展性神經(jīng)退行性疾病，主要臨床特征為：運(yùn)動(dòng)遲緩伴至少一種其它特征（靜止性震顫、肌肉強(qiáng)直、姿勢(shì)反射障礙）的存在，疾病癥狀與體征常為不對(duì)稱性，并且通常對(duì)左旋多巴治療敏感。

　　帕金森疊加綜合征或非典型性帕金森綜合征，為一組異質(zhì)性神經(jīng)退行性疾病，在疾病早期階段可能誤讀為PD。而“疊加”或“非典型”的描述，提示疾病存在不常見于iPD患者的附加癥狀，如早期姿勢(shì)不穩(wěn)、易跌倒。

　　另外，多系統(tǒng)萎縮（MSA）患者早期具有自主神經(jīng)損害、錐體束征等特征；進(jìn)行性核上行麻痹（PSP）患者具有核上性眼球運(yùn)動(dòng)障礙及額葉綜合征等特征；皮質(zhì)基底節(jié)變性（CBD）患者具有肌張力障礙、肌陣攣等的特征。其它可以歸為非典型帕金森綜合征的疾病。

　　非典型帕金森綜合征，約占帕金森綜合征的10%，并且通常對(duì)左旋多巴治療不敏感。相比于iPD，非典型帕金森綜合征病情常更加嚴(yán)重，并以皮質(zhì)、皮質(zhì)下萎縮為特征。另外，非典型帕金森樣病，可以見于其它情況，如阿爾茨海默?。ˋD）及額顳葉癡呆（FTD）。

　　一、病理學(xué)：

　　許多神經(jīng)退行性疾病，出現(xiàn)蛋白錯(cuò)誤折疊與積聚。以病理學(xué)發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)，帕金森綜合征可以分為α突觸核蛋白?。≒D、DLB、MSA）以及tau蛋白病（PSP、CBD），見于圖一。

　　α-突觸核蛋白(α-Syn)主要積聚于路易小體、路易突起（PD、DLB的病理標(biāo)志物）及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞胞漿（MSA）內(nèi)。而tau蛋白異常積聚形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)，是PSP的診斷標(biāo)準(zhǔn)，tau（＋）包涵體，為CBD患者的神經(jīng)病理學(xué)改變。

　　另外，在AD中，神經(jīng)纖維纏結(jié)是一種與Aβ淀粉樣斑塊，緊密相關(guān)的原發(fā)性病變過程；因此，AD被認(rèn)為是一種繼發(fā)性tau蛋白病。FTD也可出現(xiàn)tau蛋白病變。

　　α突觸核蛋白病與tau蛋白病常出現(xiàn)重疊。AD、PD、DLB患者的神經(jīng)元及少突膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，可出現(xiàn)tau蛋白、α突觸核蛋白病變共存現(xiàn)象。α突觸核蛋白與tau蛋白間，有復(fù)雜而又動(dòng)態(tài)的相互作用。一種蛋白異常積聚，可以使另一種蛋白傾向于聚集。例如，α-Syn可以誘導(dǎo)tau蛋白積聚，形成淀粉樣tau蛋白包涵體。

　　進(jìn)行性核上行麻痹患者，tau蛋白積聚于神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞中，形成叢狀星形細(xì)胞（F，尾狀核）以及神經(jīng)纖維纏結(jié)（G，腦橋核）。皮質(zhì)基底節(jié)變性（CBD）以星形膠質(zhì)細(xì)胞斑為特征，由星形膠質(zhì)細(xì)胞遠(yuǎn)端tau蛋白積聚形成（H，頂葉）。在CBD中，tau還會(huì)以纖維纏結(jié)形式累積于神經(jīng)元內(nèi)（H，左下角a圖）；并且在少突膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)形成卷曲小體（H，右下角b圖）。（A）常規(guī)ＨＥ染色；（B-D）α突觸核蛋白免疫化學(xué)染色；（F-H）tau蛋白免疫化學(xué)染色。

　　二、診斷面臨的挑戰(zhàn)：

　　目前帕金森綜合征的診斷，很大程度上依賴臨床，盡管一些情況下，影像學(xué)及輔助手段可能有所幫助。在一系列尸檢研究中，24%有生之年由神經(jīng)科醫(yī)生診斷為iPD患者，其實(shí)為另一種診斷結(jié)果。

　　三、腦脊液標(biāo)志物：

　　標(biāo)志物即一項(xiàng)可以評(píng)估正常生物進(jìn)程、病理改變及對(duì)干預(yù)治療藥理反應(yīng)的客觀檢測(cè)指標(biāo)。理想的生物標(biāo)志物，應(yīng)該具有敏感性高、重現(xiàn)性好、與疾病過程密切相關(guān)、廉價(jià)、非侵入性等特征。

　　相比于其他體液，腦脊液（CSF）與大腦具有更多的相關(guān)性，因此代表一種潛在的、可靠的生物標(biāo)志物來(lái)源。不同于血漿，血腦屏障并不會(huì)將CSF與大腦隔離。能夠直接反應(yīng)大腦特異性活動(dòng)及病理改變的蛋白/多肽，大多能夠擴(kuò)散至CSF中。

　　另外，CSF可以進(jìn)行連續(xù)測(cè)試，從而研究涉及病理過程的蛋白改變。因此，其優(yōu)于病理學(xué)方法，后者只能在幾十年后，反應(yīng)疾病晚期改變。

　　1.帕金森綜合癥CSF候選生物標(biāo)志物

　　Aβ42，一種42個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的多肽、傾向于積聚成淀粉樣蛋白，是淀粉樣蛋白前體(APP)經(jīng)蛋白水解酶作用后的底物，也是阿爾茨默海病腦內(nèi)主要病理標(biāo)志性蛋白之一。

　　相比于正常群體，認(rèn)知障礙及癡呆更常見于帕金森綜合征患者，對(duì)生活質(zhì)量及預(yù)期壽命有不利影響。Aβ42與PD、癡呆間的關(guān)系已被廣泛研究。

　　在帕金森綜合征患者隊(duì)列中，DLB組腦脊液內(nèi)Aβ42最低。一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，近一半DLB患者，腦脊液生物標(biāo)志物與AD患者一致，提示DLB過程中有Aβ（淀粉樣蛋白）相關(guān)的病理改變。有證據(jù)提示，低Aβ42水平，為Aβ斑塊的病理標(biāo)志物，可以預(yù)測(cè)PD患者認(rèn)知下降的過程，但是未來(lái)需要基于更大隊(duì)列的縱向研究。

　　α突觸核蛋白／α-Syn

　　α突觸核蛋白，一種140個(gè)氨基酸長(zhǎng)的蛋白質(zhì)，定位于突觸前神經(jīng)末梢，并在腦內(nèi)廣泛分布。在突觸前神經(jīng)末梢中，α-Syn接近突觸小泡。目前，尚未弄清α-Syn的具體功能，但是高度懷疑其參與神經(jīng)遞質(zhì)釋放調(diào)節(jié)中。盡管α-Syn被認(rèn)為是一種細(xì)胞內(nèi)蛋白，但它能夠在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致PD病理改變。

　　路易小體，主要由翻譯后修飾的α-Syn構(gòu)成。α-Syn沉淀是突觸核蛋白病變的關(guān)鍵致病機(jī)制。在體外，與AD相似，α-Syn纖維化對(duì)培養(yǎng)的神經(jīng)元細(xì)胞具有毒性。

　　總α突觸核蛋白／t-α-Syn

　　帕金森綜合征研究的結(jié)果并不一致，提示一些神經(jīng)退行性病變具有t-α-Syn的重疊。最近，逐漸形成一種共識(shí)，即近期大多研究（主要應(yīng)用ELISA技術(shù)）顯示，相比于對(duì)照組，PD組患者t-α-Syn水平降低。另外，其它突觸核蛋白病變，如MSA、DLB也有t-α-Syn水平的降低。

　　只有t-α-Syn水平能夠區(qū)分對(duì)照組與PD、MSA患者，而t-tau或Aβ42無(wú)此作用。t-tau/t-α-Syn及p-tau/t-α-Syn比率，或許能夠作為PD的生物標(biāo)志物（敏感性89%、特異性61%）。

　　大多研究，沒有針對(duì)t-α-Syn與疾病病程或疾病嚴(yán)重度間的關(guān)系。有趣的是，有報(bào)道顯示t-α-Syn水平具有性別特異性。Mollenhauer及Kang等研究者，開展了兩項(xiàng)針對(duì)藥物初治PD患者的研究，結(jié)果仍發(fā)現(xiàn)t-α-Syn水平的降低，提示這種現(xiàn)象與多巴胺能藥物治療無(wú)關(guān)。

　　α-Syn的低聚化與磷酸化

　　Tokuda等研究者，評(píng)估了可溶性α-Syn低聚物作為PD患者早期標(biāo)志物的效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比于健康對(duì)照組及其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病對(duì)照組，α-Syn低聚物水平及低聚物/t-α-Syn比率，在PD患者中升高（包括輕度及疾病早期）。

　　CSF內(nèi)低聚物/t-α-Syn比率，鑒定PD的敏感性為89.3%，特異性為90.6%。并且這些結(jié)果在2項(xiàng)獨(dú)立驗(yàn)證研究中，具有重復(fù)性。尸檢測(cè)得的低聚物及磷酸化低聚體形式的α-Syn，可用于區(qū)分PD、DLB及MSA。這些結(jié)果，需要進(jìn)一步在更大規(guī)模的幸存患者中進(jìn)行重復(fù)。

　　2.神經(jīng)元損傷標(biāo)志物

　　Tau蛋白對(duì)軸突內(nèi)微管功能至關(guān)重要，并且對(duì)神經(jīng)元及軸突結(jié)構(gòu)完整性中起重要作用。當(dāng)過度磷酸化時(shí)，微管結(jié)合親和力下降，導(dǎo)致障礙。同時(shí)，異常構(gòu)象，導(dǎo)致蛋白積聚及包涵體的形成。

　　總tau蛋白（t-tau）與磷酸化tau蛋白（p-tau）

　　過去，對(duì)帕金森綜合征患者腦脊液內(nèi)tau蛋白水平的評(píng)估結(jié)果，并不明確。在PD患者中，大多研究顯示tau蛋白水平正常，但是也有報(bào)道顯示其水平下降。

　　在非典型帕金森綜合征中，DLB患者顯示有t-tau蛋白水平的升高；另外與PD相比，MSA、PSP患者p-tau/t-tau比率更低。然而，其它研究沒有發(fā)現(xiàn)帕金森綜合征間具有差異。尤其，PSP患者并未發(fā)現(xiàn)顯著改善。年齡，被認(rèn)為是與t-tau蛋白水平關(guān)系最密切的影響因素。

　　總tau蛋白與磷酸化tau蛋白，可能有助于區(qū)分AD及PD患者；另外，當(dāng)聯(lián)合其它標(biāo)志物后，診斷準(zhǔn)確性優(yōu)于單獨(dú)指標(biāo)。

　　Tau蛋白異構(gòu)體

　　Tau蛋白異構(gòu)體間的失衡，與微管結(jié)合的結(jié)構(gòu)域重復(fù)三次（3R-tau）或四次（4R-tau），對(duì)神經(jīng)退行性病變發(fā)病機(jī)制很重要。正常人腦表達(dá)等量的3R-tau和4R-tau，但在PSP、CBD、FTDP-17病例中，神經(jīng)纖維纏結(jié)、膠質(zhì)細(xì)胞包涵體主要為4R，而額顳葉變性中Pick小體主要為3R；AD患者神經(jīng)纖維纏結(jié)含有3R、4R異構(gòu)體。

　　4R-tau能夠用作PSP疾病進(jìn)展的標(biāo)志物之一，但未來(lái)需要大規(guī)模樣本及縱向研究來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證。

　　截?cái)郥au蛋白

　　Borroni等研究者，探索了一些神經(jīng)退行性疾病中，全長(zhǎng)（55kDa）及截?cái)鄑au蛋白（33kDa）形式。相比于健康對(duì)照組，PSP組患者，截?cái)鄑au/全長(zhǎng)tau蛋白（33kDa/55kDa形式）比率，顯著降低（PSP與PD或DLB相比，敏感性為96%、特異性為85%；PSP與CBD相比，敏感性90%、特異性76.2%）。這些片段為tau蛋白水解產(chǎn)物，可以通過免疫沉淀技術(shù)檢測(cè)，但比ELISA技術(shù)更加費(fèi)時(shí)。

　　近期針對(duì)其它腦脊液內(nèi)源性tau片段的研究提示，可以開發(fā)針對(duì)這些片段的特異性實(shí)驗(yàn)，并且評(píng)估不同tau蛋白病變間的相關(guān)性。

　　神經(jīng)絲蛋白輕鏈（NF-L）

　　神經(jīng)絲蛋白，是維持軸突管徑及神經(jīng)元大小、形狀的主要結(jié)構(gòu)單元。因此，它們對(duì)神經(jīng)元形態(tài)完整及神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)異常重要。它們主要由3種不同分子量蛋白組成：輕鏈、中間鏈、重鏈。

　　重鏈神經(jīng)絲蛋白（NF-H）是細(xì)胞骨架的重要組成部分。相比于PD、CBD及其他神經(jīng)系統(tǒng)病變對(duì)照組，PSP及MSA患者腦脊液內(nèi)NF-H水平更高。輕鏈神經(jīng)絲蛋白（NF-L）是神經(jīng)絲蛋白的骨架成分，并具有自我組裝能力。

　　CSF內(nèi)NF-L的增高，反應(yīng)大型有髓軸突的髓鞘再生過程。近期研究顯示出一致性結(jié)果，即NF-L能夠用于區(qū)分非典型帕金森綜合征與PD，但不能用于非典型帕金森綜合征的細(xì)分。CSF的連續(xù)分析顯示，疾病進(jìn)展中，NF-L水平?jīng)]有增加。NF-L能夠用于區(qū)分PD及其它退行性疾病，因?yàn)樗鼘?duì)更激進(jìn)的神經(jīng)元死亡形式敏感，而PD中神經(jīng)元的死亡相對(duì)溫和。

　　膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）

　　GFAP是一種主要表達(dá)于星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的蛋白。急性腦損傷后，膠質(zhì)細(xì)胞解體能夠?qū)е翪SF內(nèi)GFAP水平的升高。Süssmuth等研究者發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比（非神經(jīng)退行性病變的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾?。?，帕金森綜合征患者GFAP水平升高。然而，其他課題組的研究發(fā)現(xiàn)，帕金森綜合征組與健康對(duì)照組患者間，GFAP水平相似，并未隨時(shí)間發(fā)生顯著改變。