鼠紅細(xì)胞花環(huán)形成試驗概述

B淋巴細(xì)胞與抗體合成有關(guān)，是體液免疫反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞。B細(xì)胞表面帶有膜表面免疫球蛋白(SmIg)、Fc受體及補(bǔ)體受體等。它可與抗原抗體復(fù)合物的Fc段牢固結(jié)合。選用雞或羊紅細(xì)胞，用相應(yīng)的抗紅細(xì)胞抗體致敏成EA復(fù)合物，B細(xì)胞的Fc受體能與EA結(jié)合形成花環(huán)，稱EA花環(huán)。如果EA復(fù)合物再加上補(bǔ)體，與B細(xì)胞的補(bǔ)體受體結(jié)合，則形成EAC花環(huán)。B細(xì)胞表面有鼠RBC受體，能與小鼠RBC結(jié)合，形成鼠紅細(xì)胞花環(huán)(M-RFC)，主要結(jié)合于帶有IgM受體的B細(xì)胞上，形成M-RFC的多為幼稚B細(xì)胞。本試驗臨床上主要用于檢測B淋巴細(xì)胞的數(shù)量及判斷體液免疫水平。 

• 檢查部位 其他
• 科室 體檢、保健科
• 相關(guān)疾病
• 相關(guān)癥狀

鼠紅細(xì)胞花環(huán)形成試驗正常值

• 結(jié)果：鏡下計數(shù)200個淋巴細(xì)胞，凡吸附3個或3個以上小鼠紅細(xì)胞的淋巴細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞，計算出小鼠細(xì)胞花環(huán)(ME花環(huán))的百分率。正常人外周血ME花環(huán)百分率為5%-10%。 

鼠紅細(xì)胞花環(huán)形成試驗臨床意義

• 慢性淋巴細(xì)胞白血病患者外周血液的ME花環(huán)百分率高達(dá)60%-80%，而無丙種球蛋白血癥、嚴(yán)重聯(lián)合型免疫缺陷等，ME花環(huán)百分率減低或缺如。 

鼠紅細(xì)胞花環(huán)形成試驗檢查方法

• (1)取1ml上述小鼠紅細(xì)胞懸液，加3ml生理鹽水混勻，1500r/min，離心10min，共洗3次，最后用生理鹽水配成1%小鼠紅細(xì)胞懸液(約1.4×108個細(xì)胞/ml)。
  (2)取受檢者1.5ml肝素抗凝血，用淋巴細(xì)胞分層液分離淋巴細(xì)胞，用含20%小牛血清Hank液調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107/ml。
  (3)取淋巴細(xì)胞懸液0.1ml，加等量1%小鼠紅細(xì)胞懸液，混合后置37℃水浴10min，500r/min，離心10min，放4℃冰箱2～3h。
  (4)用毛細(xì)管吸取0.05ml上清液，加1滴2g/L美藍(lán)溶液，輕輕旋轉(zhuǎn)使混勻，取1滴混合物放在玻片上，覆以蓋玻片，待細(xì)胞下沉后，用高倍鏡檢查。 

鼠紅細(xì)胞花環(huán)形成試驗注意事項

• (1)溫育時間：ME花環(huán)百分率隨溫育時間延長而逐漸增加，溫育1h，ME百分率為7.4±3.1%，而溫育18h，增至18.3±3.8%，溫育72h后，花環(huán)數(shù)又逐漸降至3.4±7.1%。
  (2)培養(yǎng)液：以用Tc199培養(yǎng)液最為適宜，其結(jié)果及重復(fù)性均好。用Hepes緩沖的RPMl 1640培養(yǎng)液洗滌和重懸淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞趨向聚集，而形成大塊細(xì)胞，從而產(chǎn)生不可靠的結(jié)果。
  (3)紅細(xì)胞與淋巴細(xì)胞的最適比例約為35∶1，比例>60∶1，或比例<25∶1時，ME花環(huán)數(shù)可減低。
  (4)保存MRBC的培養(yǎng)液：在Alsever液中，MRBC 4℃保存1周仍可產(chǎn)生穩(wěn)定的花環(huán)數(shù)，而在PBS，生理鹽水或Tc199培養(yǎng)液中保存的MRBC，隨著保存時間延長，花環(huán)數(shù)逐漸下降，保存72h后，只能看到小數(shù)花環(huán)或無花環(huán)形成細(xì)胞。